Koro-sensei: vai chính trong phim. Một người không rõ tuổi, toàn thân thì như con bạch tuột vàng, có tốc độ March 20 siêu nhanh, là giáo viên chủ nhiệm lớp 3-E. Năm xưa, ông là con người nhưng lại bị bắt làm chuột bạch thí nghiệm nên ông mới thành ra như vậy. Ông có tình cảm với Yukimura Aguri, chị của Kayano và cũng là giáo viên cũ của lớp E. Ông là một giáo viên rất nhiệt tình và rất có trách nhiệm, tuy nhiên, ông có khá nhiều điểm yếu nên lớp cũng chú ý điều đó. Cái chết của ông đã làm toàn bộ lớp E phải khóc vì phải mất đi người thầy mà mình đã gắn bó suốt 1 năm qua.

Tadaomi Karasuma: 21 tuổi, vai nam trong phim. Anh là giáo viên và kiêm người huấn luyện ám sát cho lớp E. Anh khá nghiêm khắc nhưng anh rất quan tâm học trò của mình. Anh là một đặc vụ có khả năng ám sát như một người chuyên nghiệp. Anh được vẻ ngoài điển trai thu hút nhiều con gái, đặc biệt là Irina và Hinano. 7 năm sau, anh lên làm Bộ trưởng.

Irina Jelavic: 21 tuổi, vai nữ trong phim. Cô là giáo viên và là một sát thủ chuyên nghiệp của lớp E. Cô khá kiêu ngạo nhưng cô rất yêu quý lớp E. Cô là một sát thủ chuyên nghiệp được gửi tới để ám sát Koro-sensei. Cô có mái tóc vàng uốn cong và một thân hình quyến rũ cùng với bầu ngực căng đầy khiến các anh phải đổ vì cô, kể cả Koro-sensei nhưng Karasuma thì không. Cô rất thích Karasuma, 7 năm sau, cô làm việc cho anh. Cô là người cướp mất kiss đầu của Nagisa.

Asano Gakshuu: 15 tuổi, vai nam trong phim. Là thành viên của lớp A và chủ tịch Hội học sinh, con trai Ngài Hiệu trưởng. Cậu khá kiêu ngạo nhưng cậu học giỏi và tinh thông võ thuật. Cậu là đối thủ của Karma trong các trận chiến thi học kì. Thường thì cậu thắng nhưng trong kì thi cuối kì 2, cậu đã thua Karma và đã rút ra bài học cho mình. Cậu có nhiều tài năng lãnh đạo các cuộc chiến trường học.

Gakuhoo Asano: không rõ tuổi, vai nam trong phim. Là Hiệu trưởng trường Trung học Kunigaoga. Ông luôn tự tin cách giáo dục của mình, khiến nhiều học sinh phải nói là điên cuồng lên. Nhưng sau cuộc thách thức với Koro-sensei thì ông đã coi lại mình và ông đã rời bỏ chức Hiệu trưởng sau lễ tốt nghiệp.